引用的次數,是衡量一篇科研論文影響力水平的最常用資料。為了紀念科學引文索引SCI誕生五十週年,《Nature》官方網站上公佈了一份統計資料(Van Noorden R, Maher B, Nuzzo R. The top 100 papers. Nature, 2014, 514(7524): 550-3. ),統計了目前所有科研論文的引用次數資料。
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有三篇論文的引用次數超過了100000,遙遙領先。這三篇涵蓋的領域屬於生物技術–該領域也佔了被引用最多文章的大部分名額,前十名裡有七篇。其中WB實驗就獨佔4篇,分別排名第1、2、3和6。1951年發表的Lowry蛋白定量法遙遙領先,而Bradford蛋白定量法位列第三。排在它們之間的是用於蛋白電泳的Laemmli緩衝液。排第六是WB實驗的開山之作(詳見WB–誕生歷史),發明了應用最廣的蛋白印跡的方法,也最為貼近目前實驗室用的蛋白印跡技術。
下面是引用前十大Nature論文:
1. protein measurement with the folin phenol reagent(1951), 利用福林酚試劑測量蛋白質含量(1951),引用次數:305,148;
2. Cleavage of structural proteins during the assembly of head of the dacteriophage T4(1970),噬菌體T4頭部組裝過程中結構蛋白裂解(1970),引用次數:213,005;
3. A rapid and sensitive method for the quantitation of microgram quantities of protein utilizing the principle of protein-dye binding(1976),蛋白染料結合法快速靈敏測量微克級蛋白(1976),引用次數:155,530;
4. DNA sequencing with chain-terminating inhibitors(1977),鏈終止抑制法DNA測序(1977),引用次數:65,335;
5. Singl-step method of RNA isolation by acid guanidinium thiocyanate-phenol-chloroform extraction(1987),酸性硫氰酸胍-苯酚-氯仿萃取一步提取RNA法(1987),引用次數:60,397;
6. Electrophoretic transfer of proteins from polyacrylamide gels to nitrocellulose sheets: procedure and some applications(1979),蛋白質從聚丙烯醯胺凝膠到硝化纖維素膜的電泳轉移:步驟與應用(1979),引用次數:53,349;
7. Deveiopment of the colle-Salvetti correlation-energy formula into a functional of the electron density(1988),將柯勒-薩爾維蒂相關能量方程轉化為電子密度的函數(1988),引用次數:46,702;
8. Density-functional thermochemistry. lll. The role of exact exchange(1993),密度函數的熱化學lll.正解交換的作用(1993),引用次數:46,145;
9. A simple method for the isolation and purification of total lipides from animal tissues(1957),從動物組織中分離、純化總脂肪的簡單方法(1957),引用次數:45,131;
10. CLUSTAL W:improving the sensitivity of progressive multiple sequence alignment therough sequence weighting,position-sequence alignment through sequence weighting,position-specific gap penalties and weight matrix choice(1994),CLUSTAL W:通過序列加權、位點特異性空位罰分和加權矩陣選擇來提高漸進多序列比的敏感度(1994),引用次數:40,289。
題外:
蛋白質濃度測定最準確的方法應該是「雙縮脲法」,此方法測定只與蛋白質肽鍵有關,不會因為蛋白質所含氨基酸殘基不同而出現差異。缺點是靈敏度偏低,目前已被Bradford法和BCA法所代替,但是Bradford法受到蛋白質所含鹼性或芳香族氨基酸殘基不同出現差異;BCA法雖然70%與蛋白質肽鍵有關,但是依然受到蛋白質中半胱氨酸,胱氨酸,酪氨酸和色氨酸含量不同的影響。如果能提高雙縮脲法的靈敏度,此方法將重新煥發活力。